范围:本文件规定了刺梨汁中总黄酮含量（以芦丁计）测定的紫外分光光度法。 本文件适用于刺梨原汁、浓缩汁中总黄酮含量的测定。 本文件总黄酮的检出限：0.63? mg/100?g；定量限：7.0? mg/100? g; 主要技术内容:3  原理黄酮类化合物由于自身结构特征，可在?360nm?波长附近产生最大吸收，在一定浓度范围内，其浓度与吸光度符合朗伯比尔定律。与芦丁标准品比较，进行待测物中总黄酮的定量测定。4   试剂和材料4.1 试剂4.1.1   芦丁（C27H30O16）标准品（含量≥97 %）。4.1.2  无水乙醇:分析纯。4.1.3  甲醇:分析纯。4.2  标准溶液配制4.2.1 芦丁标准储备溶液称取?25 mg（精确至?0.1 mg）芦丁，加甲醇溶解并定容至?25 mL，得?1mg/mL?标准储备溶液。4.2.2  芦丁标准中间溶液吸取芦丁标准储备溶液?2.5 mL，加甲醇溶解并定容至?100mL，得?25 μg/mL?标准工作溶液。5   仪器和设备5.1 天平:感量为?0.1mg。5.2 超声波清洗器。5.3 紫外分光光度计。6  分析步骤6.1  试样制备称取?1g（精确至?0.1 mg）的试样至?25ml?容量瓶中，用乙醇定容，摇匀后，超声提取?20min，室温静置?30min。6.2标准工作曲线准确吸取芦丁标准中间溶液?1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL?分别置于?25mL?比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，配置成浓度为?1.0μg/mL、2.0μg/mL、3.0μg/mL、4.0μg/mL、5.0μg/mL?系列标准溶液，用?1cm?比色皿，以甲醇调节零点，于波长?360nm?处测定其吸光度值。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。6.3　试样的测定吸取上述提取液?1.0mL?于?25mL?比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，用?1cm?比色皿，以甲醇调节零点，于波长?360nm?处测定吸光度。同时做试剂空白。7分析结果的表述试样中总黄酮含量（以芦丁计）按公式（1）进行计算。C×V×F×100X = ----------------M×1000                   ………………………（1）式中:X───试样中总黄酮含量（以芦丁计）,单位为毫克每百克（mg/100 g）；C───试样提取液中被测总黄酮含量（以芦丁计）,单位为微克每毫升（μg/mL）；M───试样质量,单位为克（g）；F───提取液稀释倍数；V ───试样定容体积,单位为毫升（mL）； 计算结果保留小数点后两位。8   精密度在重复条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的?10 %