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高麦黄酮小麦籽粒中游离态麦黄酮及总麦黄酮含量指标和测定方法
发布日期: 2022-02-08
实施日期: 2022-02-08
范围:本文件规定了游离态麦黄酮、总麦黄酮、高麦黄酮小麦的术语、定义和游离态麦黄酮含量、总麦黄酮含量指标及其检测方法。 本文件适用于小麦籽粒中游离态麦黄酮及总麦黄酮含量的定量测定。企业在制定企业标准时可参照使用,相关机构在选育、审定和应用高黄酮小麦及其制品时可参照使用; 主要技术内容:3.1 游离态麦黄酮 Tricin游离态麦黄酮,又称麦黄酮、苜蓿素、小麦黄素,化学名称为5,7,4’-三羟基-3’,5’-二甲氧基黄酮。游离态麦黄酮具有较强的抗氧化能力,能够调节心血管功能,抑制癌细胞生长,延迟自发性乳腺肿瘤的发生。3.2 总麦黄酮 Total wheat flavonoid总麦黄酮,即小麦中黄酮类物质的总含量。黄酮类物质属多酚类化合物,是两个苯环通过三个碳原子相互连接而成的一系列化合物的总称,包含游离态麦黄酮、黄酮苷元及糖苷衍生物。黄酮类物质具有很强的抗氧化和清除自由基的能力,同时具有改善心血管疾病症状、抗癌抗肿瘤、抗菌抗炎、增强人体免疫力等多重功效。3.3 高麦黄酮小麦 High flavonoid wheat在小麦生长发育过程中,籽粒中自然产生和积累的游离态麦黄酮含量大于0.5 mg/kg(含)或者总麦黄酮含量大于1 mg/kg(含)的小麦品种(不含黑、紫、蓝等彩色小麦)。4 检测方法4.1 小麦籽粒中麦黄酮含量的测定方法 高效液相色谱-串联质谱法4.1.1 原理试样用80%乙醇溶液提取,经离心浓缩后复溶,用液相色谱串联质谱仪检测,外标法定量。4.1.2 试剂除另有规定外,水应符合GB/T 6682中规定的一级水。4.1.2.1 乙醇(CH3 CH2OH,CAS号:64-17-5):色谱纯。4.1.2.2 甲醇(CH3OH,CAS号:67-56-1):色谱纯。4.1.2.3 甲酸(HCOOH,CAS号:64-18-6):色谱纯。4.1.2.4 标准品(麦黄酮,Tricin,520-32-1):纯度≥95.0%。4.1.3 溶液配制4.1.3.1 80%乙醇溶液:取800 mL乙醇,加入200 mL水,摇匀备用。4.1.3.2 0.1%甲酸溶液:取1000 mL水,加入1 mL甲酸,摇匀备用。4.1.4 标准溶液配制4.1.4.1 标准储备溶液分别称取5 mg标准物质于10 mL容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,标准溶液避光-40 ℃保存,保存期为一年。4.1.4.2 材料微孔过滤膜(尼龙):0.22 μm。4.1.5 仪器和设备4.1.5.1 液相色谱-串联质谱仪:配有电喷雾离子源(ESI)。4.1.5.2 离心管:2 mL。4.1.5.3 分析天平:感量0.1 mg。4.1.5.4 移液器:1 mL。4.1.5.5 震动球磨仪。4.1.5.6 样品瓶:2 mL,带聚四氟乙烯旋盖。4.1.5.7 涡旋混合器。4.1.5.8 氮气吹干仪。4.1.5.9 高速离心机:13000 r/min。4.1.5.10 超声波清洗仪
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