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黄芩茎叶中黄芩苷含量测定标准
发布日期:
2024-11-11
实施日期:
2024-12-01
范围:本文件规定了宁夏地区黄芩茎叶中黄芩苷测定术语、定义、原理、试剂、材料、仪器、设备、样本采集与制备、测定步骤、结果计算等。
本文件适用于宁夏地区黄芩茎叶中黄芩苷含量测定。检出限为7.8125~250μg/ mL;
主要技术内容:高效液相色谱法以经典的液相色谱为基础,以液体为流动相,将不同极性的溶剂泵入装有颗粒极细的高效固定相色谱柱中,在色谱柱中被分离并进入检测器进行检测,从而实现对样本的快速、高灵敏的检测。通过此方法对黄芩茎叶中黄芩苷进行检测和确证。7测定步骤7.1试样的制备取黄芩茎叶样品于多功能粉碎机粉碎,过20目筛网备用。7.2液相溶液的制备7.2.1 标准品溶液制备精密称取黄芩苷5 mg,置于10 mL容量瓶,甲醇定容至刻度,即得0.5 mg/mL黄芩苷标准品溶液。7.2.2 试样品溶液制备精密称取过筛黄芩茎叶粉0.3 g, 70%乙醇40 mL置于150 mL圆底烧瓶60℃加热回流3 h,待冷却后,滤液置100 mL量瓶中,用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣,洗液滤入同一量瓶中,最终70%乙醇至刻度,摇匀。吸取1 mL, 甲醇定容至10 mL容量瓶中,0.22 um滤膜过滤,即得试样品溶液。7.3 试样的测定吸取供试品溶液20μL ,在流动相为甲醇:0.2%磷酸水(47:53),柱温30℃,波长280 nm,流速1mL/min条件下进样,重复测定3次。7.4 标曲建立取0.5 mg/mL准品溶液适量,分别配制浓度为250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 μg/mL的黄芩苷标准溶液,吸取标准品溶液20μL,流动相为甲醇-0.2%磷酸水(47:53),柱温30℃,波长280 nm,流速1mL/min条件下进样,以峰面积对应的质量浓度建立黄芩苷标准曲线。8 结果计算以峰面积值(Y)为纵坐标, 对照品进样量(X)为横坐标绘制标准曲线,,黄芩苷回归方程为:Y=35031.8013X-11.628521,r2=0.99985,测得黄芩茎叶提取物中黄芩苷含量占比为2.27%
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