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严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸qRT-PCR方法检测技术规程
发布日期:
2020-06-08
实施日期:
2020-07-08
范围:本标准规定了严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)通用qRT-PCR方法(Taqman探针法)的术语、定义和缩略语、检测原理、实验前准备、样本采集、保存及运输、检测流程和结果判定的要求。
本标准适用于开展严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)qRT-PCR检测技术的机构,通过对疑似感染患者样本中的SARS-CoV-2核酸进行检测;
主要技术内容:严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸qRT-PCR检测采用PCR扩增和荧光探针相结合的方法,针对严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2的高度保守序列,合成特异性引物和特异性的荧光双标记探针。探针的5’端标记荧光素基团,3’端标记淬灭基团。在PCR扩增过程中,特异性引物和探针与靶序列结合,通过Taq酶的DNA聚合酶活性和5’-3’外切酶活性,在延伸到荧光探针时,将其切断,此时荧光素基团和淬灭基团分离,淬灭作用消失,荧光信号产生。通过对荧光信号的检测,实现对样本中SARS-CoV-2核酸的定性检测
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