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金银花茎叶中绿原酸含量测标准
发布日期: 2024-11-11
实施日期: 2024-12-01
范围:本文件规定了宁夏地区金银花茎叶中绿原酸测定术语、定义、原理、试剂、材料、仪器、设备、样本采集与制备、测定步骤、结果计算等。 本文件适用于宁夏地区金银花茎叶中绿原酸含量测定。检出限为57–340μg/mL; 主要技术内容:高效液相色谱法以经典的液相色谱为基础,以液体为流动相,将不同极性的溶剂泵入装有颗粒极细的高效固定相色谱柱中,在色谱柱中被分离并进入检测器进行检测,从而实现对样本的快速、高灵敏的检测。通过此方法对金银花茎叶中绿原酸进行检测和确证。7.1 试样的制备取金银花茎叶样品于多功能粉碎机粉碎,过20目筛网备用。7.2 液相溶液的制备7.2.1 标准品溶液制备准确称取3.4 mg绿原酸标准品, 50%甲醇定容10 mL容量瓶,即得0.34 mg/mL绿原酸标准对照品溶液。7.2.2 试样品溶液制备精密称取过筛金银花粉10 g,加入8倍水,浸泡30 min,煎煮30 min,过滤,滤渣加入7倍水,再次煎煮30 min,合并滤液,经旋转蒸发仪浓缩,真空冷冻干燥机干燥,即得金银花提取物。精密称取金银花提取物50 mg,50%甲醇定容至10 mL容量瓶,经0.22 um滤膜过滤,即得供试品溶液。7.3试样的测定吸取供试品溶液20μL,在流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(10﹕90),柱温30℃,波长327 nm,流速1mL/min条件下进样,重复测定3次。7.4 标曲建立取0.34 mg/mL绿原酸标准品适量,分别配置浓度为57、68、85、113、170、340 μg/mL的绿原酸标准溶液,在流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(10﹕90),柱温30℃,波长327 nm,流速1mL/min条件下进样,以峰面积对应的质量浓度建立绿原酸标准曲线。8  结果计算以峰面积值(Y)为纵坐标, 对照品进样量(X)为横坐标绘制标准曲线, 绿原酸回归方程为: Y=14897x - 2.4571,R2 = 0.9996,测得金银花茎叶提取物中绿原酸含量占比为1.585%(附录A)
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