主要技术内容:8 技术要求8.1 原材料和辅料8.1.1 应符合 T/CSCB 0009-2022 要求。8.1.2 应建立供者细胞采集的供者评估与筛选标准、采集方法、运输标准和交接标准，保证供者和细胞的安全。8.1.3 供体应筛查 HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、HCMV 和 TP，并记录结果。8.2 采集与培养方法8.2.1 样本采集8.2.1.1 人羊膜组织样本采集应由专业的医护人员完成。8.2.1.2 羊膜的采集场所应达到Ⅲ级洁净手术室要求。8.2.2 样本运输8.2.2.1 样本运输人员应是经过培训合格的专门人员。8.2.2.2 羊膜样本的运输温度为 2℃～8℃，样本离体时间不宜超过 24h。8.2.2.3 样本运输过程应受控并建立记录档案。8.2.3 样本接收8.2.3.1 接收样本时应先检查容器外观有无破损，并记录。8.2.3.2 检查《样本采集信息记录表》的信息是否齐全，确认无误后对样本进行唯一性标识。8.2.3.3 用 75%的医用酒精对容器外表面进行消毒，依据样本接收标准，对检测达标后的样本进行接收；检测不达标的样本拒收后进行销毁，并做好相应记录。8.2.4 分离及提取人羊膜组织样本剪至片状，用胰酶消化法分离人羊膜上皮干细胞。进行人羊膜上皮干细胞原代培养。8.2.5 人羊膜上皮干细胞培养 根据细胞的生长情况换液和传代。8.2.6 人羊膜上皮干细胞冻存 冻存细胞程序降温后置液氮中保存。8.2.7 人羊膜上皮干细胞复苏 取出冻存管进行快速融化、离心洗涤后进行培养。8.2.8 人羊膜上皮干细胞溶液 人羊膜上皮干细胞溶液应为均质状态，无絮状沉淀，细胞存活率≥90％。8.3 关键质量属性8.3.1 细胞形态 细胞贴壁培养时呈不规则多角型，铺路石样生长，形态均一。8.3.2 染色体核型 正常核型应为 46,XX 或 46,XY。8.3.3 细胞存活率 未冻存细胞存活率≥90%且冻存复苏后细胞存活率≥70%。8.3.4 细胞标志蛋白 CK19、CD29、CD44、CD73、CD90、CD105 表达阳性； CD31、CD34、CD45 和 CD49d 表达阴性。8.3.5 免疫调节 经炎症因子（IFN-γ或者 IFN-γ联合 TNF-α）诱导后表达吲哚胺 2,3-双加氧酶（IDO）。与 T 淋巴细胞共培养能抑制 T 淋巴细胞增殖及分泌 IFN-γ、TNF-α。8.3.6 三系分化 具有成骨、成脂和成软骨的分化潜能。8.3.7 成瘤性 免疫缺陷动物（如小鼠）体内成瘤试验结果为阴性。8.3.8 微生物 真菌、细菌、支原体、HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、HCMV、TP 为阴性。8.4 过程控制8.4.1 扩增、冻存、复苏等过程控制应符合 T/CSCB 0009-2022 要求。8.4.2 细胞 STR 检测结果应与供体细胞保持一致